Biblioteki

 0    13 Datenblatt    magdapawlowska45
mp3 downloaden Drucken spielen überprüfen
 
Frage Antworten
biblioteka genomowa
Lernen beginnen
zbiór fragm chromosomalnego i oranelarnego DNA org umieszczonych w okr wektorach (wielkość zal od met i przygorowania DNA)
bibloteka cDNA
Lernen beginnen
analogiczny zbiór fragm DNA powstałych na matrycy mRNA poprzez odwrotną trankrypcję (wielkość fragm zal od długości mRNA i metody)
Biblioteka cDNA liczebność
Lernen beginnen
liczebność zależy od poziomu transkrypcji poszukiwanego genu – udział w puli cDNA
Biblioteka znormalizowana
Lernen beginnen
zawiera wyrównanie liczebności cDNA poszczególnych genów
Reakcja chemiczna II-rzędu
Lernen beginnen
r=k[A][A]=k[A]2 r- szybkość rcji [A]- stężenie substratów tu nić DNA
Normalizacja bibliotek cDNA
Lernen beginnen
mniej więcej równa reprezenacja licznych i mniej licznych transkryptów
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów
Lernen beginnen
Biotynę można dodać do czapeczki lub startera, streptamidyną pokryte są kulki metalowe i można te cząsteczki wytrącić z roztworu bo one razem się prawie magnetycznie łączą
Wytrącanie cząsteczek kw nulk z roztworów i zależność szybkości od stężenia
Lernen beginnen
Jeżeli mamy duże stężenie obydwu nici to reakcja renaturacji przebiega szybciej. Jak małe to o wiele wolniej
przeglądanie różnicowe (differential screening)
Lernen beginnen
w stos dużym zbiorze klonów (bibl) wyszukiwanie pojedynczych klonów, które ulegaja ekspresji tylko w jednej ze sprawdzanych tk (organi, stanie fizjol)
Subtrakcja (subbtraction)
Lernen beginnen
(tworzenie bib subtrachowanej) masowe i automatyczne
Standardowe przeglądanie biblioteki
Lernen beginnen
• zwykła bibl cDNA (z mRNA +): poszukiwanie gł klonów indukowanych • wysiew bibl i odciski replik na filtrach • konstrukcja sond molek + i – cDNA i hybrydyzacja
Cold plaque screening -, przeglądanie zimnych łysinek” (virtual subtraction)
Lernen beginnen
• bibl cDNAA z mRNA + nie trzeba replik odcisków • sonda z mRNA - • ciekawe są te łysinki które nie hybrydyzują
dotblot z cDNA z tkanki (zal od stężenia)
Lernen beginnen
jak go jest dużo to pojawia się w postaci ciemnej plamki. Izoluje się taką sekwencję i mnoży PCR. Umożliwia też sklonowaie genów o niskim poziomie ekspresjii

Sie müssen eingeloggt sein, um einen Kommentar zu schreiben.